產(chǎn)品用途

1. 合成單鏈RNA；
2. 制備放射性標(biāo)記RNA探針
3. 合成siRNA前體
4. 制備用于研究RNA結(jié)構(gòu)、加工和催化的RNA

*使用帽結(jié)構(gòu)類似物，制備帽化RNA

產(chǎn)品包裝

活性定義

在37℃、pH8.0的條件下，1小時(shí)內(nèi)使1nmol的GMP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位。

保存體系

50%甘油，50 mM Tris-HCl,  pH 8.0, 100 mM NaCl, 10 mM DTT, 1 mM EDTA ，0.1% Triton X-100。

保存溫度：-20℃，或-80℃長(zhǎng)期保存。

參考反應(yīng)體系（100μl）

混勻后，37℃反應(yīng)2～3小時(shí)。

注意事項(xiàng) 

1. 在反應(yīng)體系中可添加 RNase Inhibitor（終濃度為1U/μl），防止 RNase 污染。 
2. 為了特定區(qū)域的有效轉(zhuǎn)錄，建議在其區(qū)域下游把模板DNA預(yù)先切成平端或 5′突出末端； 
3. 緩沖液中的亞精胺與核酸結(jié)合可能形成不溶物，建議最后加入模板 DNA； 
4. 模板DNA質(zhì)量對(duì)合成的mRNA數(shù)量和質(zhì)量非常重要，應(yīng)為完全線性化、 RNase A-Free、高純度，建議OD260/280為1.8~2.0。
5. 可在反應(yīng)體系中添加無(wú)機(jī)焦磷酸酶（終濃度為4U/ml），以增加mRNA產(chǎn)量。
6. 隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，如果酶活性明顯下降，可能是由于反應(yīng)緩沖液中DTT的分解。若觀察到mRNA產(chǎn)量下降，可在反應(yīng)體系中添加DTT至終濃度為10mM。